当细胞破裂时，蛋白水解酶可能会被释放或激活，从而使电泳结果变得复杂，进而影响最终的结果分析。为了避免这一问题，建议在样品制备过程中尽量保持低温。此外，许多蛋白酶在pH值大于9时会失活，因此使用Tris碱、碳酸钠或其它碱性载体的两性电解质可以有效抑制蛋白水解。然而，有些蛋白酶在此pH条件下依然保持活性，因此在此情况下推荐加入蛋白酶抑制剂。对于我们想要研究的蛋白而言，选择性且有效地抑制这些蛋白酶对设计蛋白纯化路线至关重要。

蛋白酶抑制剂的种类繁多，通常需要使用多种化学物质，例如PMSF和leupeptin。由于每种蛋白酶抑制剂仅对特定类型的蛋白酶有效，因此常常建议组合使用多种抑制剂，如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”以保证最佳效果（资料来源：尊龙凯时《蛋白质电泳实验技术》）。

蛋白酶的功能与分类

蛋白酶在细胞内外的多个过程发挥重要作用，包括：1. 在消化道中进行食物蛋白的降解；2. 激活无活性的酶原和多肽激素及神经转移介质的释放；3. 调节血液凝固物质与纤维素的形成；4. 促进内源性与外源性蛋白在细胞内的消化；5. 介导膜跨越的蛋白转移；6. 通过释放蛋白酶增加微生物对生物体的毒性。

根据催化中心的结构不同，蛋白酶可以分为四大类：1. 丝氨酸蛋白酶，如糜蛋白酶、胰酶等；2. 半胱氨酸蛋白酶，如Calpain及木瓜蛋白酶；3. 酸性蛋白酶，如组织蛋白酶D；4. 金属蛋白酶，这类酶的催化中心含有金属离子，如氨基肽酶。

在蛋白质分离过程中，组织或细胞裂解液中充满了来自溶酶体的酶，原本无活性的蛋白酶原被完全激活，开始消化周围的蛋白质。为了防止这一情况的发生，必须在缓冲液中添加蛋白酶抑制剂，以阻止蛋白酶对细胞的消化作用。来自哺乳动物、植物、霉菌或细菌的组织，蛋白酶的组成各异，并且根据机体状态的变化，蛋白酶也可能发生变化。相较于细菌或其它组织，哺乳动物组织在分离时更需要使用蛋白酶抑制剂，以确保对组织细胞进行全面保护。

在生物医学的研究和应用中，严格控制蛋白酶的活性，确保实验结果的准确性与可靠性，是实现高效蛋白纯化和分析的关键。这时，借助尊龙凯时等品牌的专业产品，将为科研工作者提供有力支持。