细胞转染技术是将外源遗传物质引入目标细胞的关键方法，在生命科学、生物医药研发及新药开发中起着不可或缺的作用。化学转染法是目前最广泛使用的转染方式，其优点在于可以通过精确控制化学物质的浓度和作用时间来优化转染效率和时机。因此，选择合适的转染试剂对于成功和高效的细胞转染实验至关重要。

如何选择转染试剂

市面上存在多种转染试剂，它们的性能差异显著，因此选择合适的试剂需要考虑多个因素：

1. 根据实验目的

根据实验需求选择稳定转染或瞬时转染。二者在步骤上类似，但对外源基因的要求有所不同。稳定转染通常使用具有复制能力的质粒或病毒载体，而瞬时转染不需要。一般而言，稳定转染使用脂质体类试剂，细胞通过内吞作用实现转染，而瞬时转染多使用纳米聚合物类试剂。

2. 根据细胞种类

不同细胞类型对转染效率的影响显著，例如HEK293T细胞转染效率高，而某些癌细胞如肝癌细胞和乳腺癌细胞的转染效率则比较低。贴壁细胞和悬浮细胞在转染过程中对试剂的需求有所不同，贴壁细胞通常使用脂质体介导转染，而悬浮细胞则可能适合聚合物介导的转染方式。

3. 根据基因种类

转染的基因主要分为DNA和RNA两种，DNA转染主要用于基因表达，而RNA转染则用于导入干扰RNA。需要注意的是，不同试剂在DNA和RNA转染中可能表现迥异，因此选择时应考虑核酸类型及其特性。

4. 根据转染效果

理想的转染试剂应具备高效转染和低细胞毒性。高转染效率确保更多外源基因被导入细胞，而低细胞毒性则有助于提高细胞存活率，从而增强实验结果的可靠性。一般而言，细胞死亡率低于15%的转染试剂具有更强的竞争力。

5. 根据操作简便性

选择操作简单且省时的转染试剂可以显著降低实验的时间成本。包括转染前后是否需要更换培养基、所需试剂组分数量、孵育方式和时间等，操作简便的试剂在实验设计中具有明显优势，既节省材料及时间成本，又简化了实验步骤，提升了整体实验效率。

尊龙凯时提供的转染试剂系列包括1BGPNAM11/BGPNAM11Plus，这些产品以纳米阳离子聚合物为主要成分，能够高效与带负电荷的核酸分子结合。其转染效率对常用工程细胞如HEK293/293T可达到95%以上，同时对CHO-K1、MCF7、HepG2等细胞也表现出良好的转染效果。此外，尊龙凯时的转染试剂具有低细胞毒性，转染48小时后细胞活率可高达85%，并且操作便捷，无需更换培养基，节约实验时间和材料成本。

实验干货

影响转染的主要因素

1）抗生素：培养基中添加的抗生素可能影响转染结果，需注意其对细胞的毒性及对转染效率的影响。
2）血清：血清会影响复合物的形成以及转染效率，应优化转染条件以适应培养基中血清的含量。
3）细胞状态：使用经过1-2次传代的细胞以确保其活力和增殖能力。
4）细胞密度：不同转染试剂对细胞密度有不同要求，贴壁细胞通常需保持在60%-90%汇合度。
5）核酸质量：高纯度、无内毒素的核酸对于提高转染效率至关重要。

为什么许多转染需要更换培养液？

转染后需更换培养液的原因包括：某些转染试剂在使用时要求无血清培养基，以免影响转染效果；转染试剂本身可能具有毒性，长时间暴露可能导致细胞损伤，因此需在一定时间后更换那些含有转染试剂的培养液。

如何判断细胞汇合度？

细胞汇合度的判断可通过观察显微镜下细胞铺板状态来实现。