本试剂盒仅限于科学研究用途,禁止用于医学诊断。以下是关于人胸腺活化调节趋化因子(TARC)的强效ELISA试剂盒使用说明。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加样本、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。随后,通过底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的作用下转换为蓝色,最终在酸性条件下变为黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)浓度成正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)以计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟以迅速小心分离血清和红细胞。
- 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织添加适量生理盐水并捣碎,3000转离心10分钟取上清。
- 保存:如样本未能及时检测,请按一次使用量分装,冷冻保存于-20℃,避免反复冻融,解冻时应在室温下进行并确保均匀充分解冻。
操作注意事项
请根据指示准备所需的试剂和试剂盒组成。标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释需用蒸馏水按1:20的比例进行,即1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。
洗板方法
注意操作步骤,以确保结果的准确性。
结果判断
在Excel表格中绘制标准曲线,将标准品浓度作为横坐标,OD值作为纵坐标,形成标准品线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明
本试剂盒为