本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。人可溶性E选择素(sE-selectin)的ELISA检测根据双抗体一步夹心法进行。测试过程如下:
检测原理
此试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。将样品、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入到预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,并经过温育和彻底洗涤。采用TMB底物进行显色反应,在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,然后在酸性环境中转变为黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并计算样品中的浓度。
样品收集、处理和保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管进行采样,避免任何细胞刺激。收集血液后,以3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。以3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:在3000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将适量生理盐水与组织混合捣碎,之后以3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如样本在采集后未及时检测,建议按单次使用量分装并于-20℃冷冻保存,避免反复冻融。样本解冻时需在室温下进行,确保其均匀充分解冻。
操作注意事项
本试剂盒的组成中标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。对于20×洗涤缓冲液的稀释,请使用蒸馏水以1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
结果判断
通过Excel绘制标准曲线,将标准品浓度作为横坐标,对应OD值作为纵坐标,绘制线性回归曲线并依照曲线方程计算各样本浓度。这确保了结果的准确性和可靠性。
请注意,以上信息仅供参考,使用本试剂盒前请详阅相关说明。我们致力于提供高质量的试剂和服务,让科研之路更加顺畅。选用尊龙凯时品牌产品,助力您的科研成果!